PCR實驗室中的氣溶膠污染來源于兩個過程:樣本制備過程和PCR擴增過程。
在樣本制備過程中,樣本液體面與空氣摩擦就可形成氣溶膠,在操作時比較劇烈地搖動反應管、開蓋時、吸樣時及加樣器的反復吸樣都可能形成氣溶膠而污染;PCR擴增過程可以引起實驗室中擴增產物的累積,通常一次典型的PCR擴增可以產生109拷貝的靶序列,如果氣溶膠化,甚至的氣溶膠都會含有106拷貝的擴增產物。
如果不加以控制,在短期內累積的氣溶膠化擴增產物就會污染實驗室中的試劑、儀器設備和通風系統,造成嚴重的實驗室污染,導致檢驗樣本出現假陽性結果,使臨床做出錯誤的判斷和決策,進而引發后續一系列的事故和恐慌。
①臨床標本中存在的大量待測微生物或待測靶核酸
②科研中得到的質粒
③以前分析研究的特定微生物或靶核酸
④大量存在于實驗環境中的特定微生物或靶核酸
⑤以前擴增產物的殘留污染,這也是 PCR 實驗室產生的將造成假陽性的“污染”。
PCR擴增可以引起實驗室中擴增產物的累積,通常一次典型的PCR
擴增可以產生109拷貝的靶序列,如果氣溶膠化,甚至的氣溶膠都會含有106拷貝的擴增產物。如果不加以控制,在短期內累積的氣溶膠化的擴增產物即會污染實驗室中的試劑、儀器設備和通風系統,從而造成嚴重的實驗室“污染”,出現大量的假陽性結果。
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